■ Iomallachd luath de genomes fala àrd-inbhe.
■ Chan eil feum air ath-ghiùlan organach puinnseanta leithid phenol / cloroform.
■ Faodar truaillearan agus luchd-dìon a thoirt air falbh gu tur, goireasach airson tagradh sìos an abhainn.
■ Faodar an cromag seo a chleachdadh ann an ionadan-obrach às-tharraing searbhag niuclasach fèin-ghluasadach àrd.
■ PCR agus qPCR fìor-ùine
Faodar na toraidhean gu lèir a ghnàthachadh airson ODM / OEM. Airson mion-fhiosrachadh,cliog air Seirbheis Customized (ODM / OEM)
Chaidh Genome DNA a thoirt a-mach à 600 µl de fhuil a ’cleachdadh TIANamp N96 Blood DNA Kit.
Bha dùmhlachd gel agarose 1%. Chaidh an electrophoresis a dhèanamh fo 6V / cm airson 20 min. M: Comharra DNA λDNA / Hind III
A-1 Cruinneachadh ìosal de cheallan no bhìoras anns an t-sampall tòiseachaidh - Neartaich cruinneachadh cheallan no bhìorasan.
A-2 lysis gu leòr de na sampallan - Cha deach na samples a mheasgachadh gu mionaideach leis a ’bhufair lysis. Thathas a ’moladh measgachadh gu mionaideach le bhith a’ gluasad pulse-vortexing airson 1-2 uair. - lysis cealla gu leòr air adhbhrachadh le lùghdachadh gnìomhachd proteinase K. - lysis cealla gu leòr no truailleadh pròtain mar thoradh air ùine bath blàth gu leòr. Thathas a ’moladh an stuth a ghearradh ann am pìosan beaga agus an ùine amar a leudachadh gus an còrr den lysate a thoirt air falbh.
A-3 Às-làthaireachd DNA gu leòr. - Cha deach ethanol no ceudad ìosal an àite 100% ethanol a chuir ris mus deach an lysate a ghluasad chun cholbh snìomh.
A-4 Tha luach pH bufair elution ro ìosal. - Atharraich am pH gu eadar 8.0-8.3.
Ethanol iarmharach anns an eluent.
—Tha bufair nighe iarmharach PW anns an eluent. Faodar an ethanol a thoirt air falbh le bhith a ’centrifuging a’ cholbh shnìomh airson 3-5 min, agus an uairsin ga chuir aig teòthachd an t-seòmair no guireadair 50 ℃ airson 1-2 min.
A-1 Chan eil an sampall ùr. - Thoir air falbh sampall DNA adhartach mar smachd gus faighinn a-mach a bheil an DNA san t-sampall air crìonadh.
A-2 Ro-làimhseachadh neo-iomchaidh. - Air a chleachdadh le cus bleith nitrogen leaghte, faighinn air ais taiseachd, no cus cus den t-sampall.
Bu chòir na pretreatments atharrachadh airson diofar shamhlaichean. Airson sampaill planntrais, dèan cinnteach gum bi thu a ’bleith gu mionaideach ann an leaghan nitrogen. Airson sampaill bheathaichean, homogenate no bleith gu domhainn ann an leaghan nitrogen. Airson samples le ballachan cealla a tha duilich a bhriseadh, leithid bacteria G + agus beirm, thathas a ’moladh dòighean lysozyme, lyticase no meacanaigeach a chleachdadh gus na ballachan cealla a bhriseadh.
4992201/4992202 Kit Kit Genomic DNA a ’cleachdadh modh stèidhichte air colbh a dh’ fheumas cloroform airson an toirt a-mach. Tha e gu sònraichte freagarrach airson diofar shamhlaichean planntrais, a bharrachd air pùdar tioram planntrais. Tha Hi-DNAsecure Plant Kit cuideachd stèidhichte air colbh, ach gun fheum air toirt air falbh phenol / cloroform, ga dhèanamh sàbhailte agus neo-phuinnseanta. Tha e freagarrach airson lusan le susbaint àrd polysaccharides agus polyphenol. 4992709/4992710 Siostam Lusan DNAquick a ’gabhail ri modh stèidhichte air leaghan. Chan eil feum air às-tharraing phenol / cloroform cuideachd. Tha an dòigh glanaidh sìmplidh agus luath gun chrìoch airson na suimean tòiseachaidh sampall, agus mar sin faodaidh luchd-cleachdaidh an sùim atharrachadh gu sùbailte a rèir na riatanasan deuchainneach. Gheibhear meud mòr de mhìrean gDNA le toradh àrd.
Faodar às-tharraing DNA clot fala a dhèanamh a ’cleachdadh na h-ath-bheachdan a tha air an toirt seachad anns an dà chit seo le bhith dìreach ag atharrachadh a’ phròtacal chun an stiùireadh sònraichte airson às-tharraing DNA clot fala. Faodar an leth-bhreac bog de phròtacal às-tharraing DNA clot fala a thoirt seachad ma thèid iarraidh.
Cuir casg air an sampall ùr le 1 ml PBS, saline àbhaisteach no bufair TE. Cuir homogenizer gu tur ris an sampall le homogenizer agus cruinnich an dùsgaidh gu bonn tiùba le bhith a ’centrifuging. Cuir às don àrd-ùrlar, agus ath-chosg an dùsgaidh le bufair 200 μl GA. Faodar an glanadh DNA a leanas a dhèanamh a rèir an stiùiridh.
Airson glanadh gDNA ann an sampallan plasma, serum agus fluid bodhaig, thathas a ’moladh TIANamp Micro DNA Kit. Airson glanadh gDNA bhìoras bho shamhlaichean serum / plasma, thathas a ’moladh TIANamp Virus DNA / RNA Kit. Airson purhadh gDNA bacterial bho shamhlaichean serum agus plasma, thathas a ’moladh Kit DNA TIANamp Bacteria (bu chòir lysozyme a thoirt a-steach airson bacterial adhartach). Airson sampaill seile, thathas a ’moladh Kit DNA Hi-Swab agus Kit DNA TIANamp Bacteria.
Thathas a ’moladh Kit Plant DNAsecure no Siostam Lusan DNAquick airson toirt a-mach genome fungach. Airson às-tharraing genome giosta, thathas a ’moladh Kit DNA TIANamp Yeast (bu chòir lyticase a bhith fèin-ullaichte).
Bho chaidh a stèidheachadh, tha an fhactaraidh againn air a bhith a ’leasachadh toraidhean den chiad ìre le bhith a’ cumail ris a ’phrionnsapal
de chàileachd an toiseach. Tha na toraidhean againn air cliù air leth fhaighinn anns a ’ghnìomhachas agus luachmhor am measg luchd-ceannach ùr is sean.