■ Simple agus luath: Faodar toirt a-mach RNA iomlan bho shamhlaichean planntrais a chrìochnachadh taobh a-staigh 30 mionaidean.
■ Co-chòrdalachd làidir: Tha an cromag seo chan ann a-mhàin freagarrach airson sampallan cumanta de dhuilleagan is dhuilleagan, ach cuideachd airson sampallan làn polysaccharide / polyphenol.
■ Sàbhailte agus ìosal puinnseanta: Chan eil feum air ath-bheachdan puinnseanta leithid β-mercaptoethanol, DTT, cloroform, phenol.
■ Freagarrach airson gnìomhachd sìos an abhainn, a ’toirt a-steach RT-PCR, RT-qPCR, hybridization chip, Northern Blot, Dot Blot, sgrìonadh PolyA, eadar-theangachadh in vitro, mion-sgrùdadh dìon RNase agus clònadh moileciuil, msaa.
Faodar na toraidhean gu lèir a ghnàthachadh airson ODM / OEM. Airson mion-fhiosrachadh,cliog air Seirbheis Customized (ODM / OEM)
An RNA iomlan de shamhlaichean duille 65 mg (duilleagan clove, duilleagan hibiscus, duilleagan cruithneachd, duilleagan rus, duilleagan measan ugli, duilleagan Prunus cerasifera, duilleagan fige, duilleagan daylily, duilleagan Kerria japonica), sampaill fungas 150 mg (Lentinus edodes) agus 200 Chaidh sampallan petal mg (bileagan lili latha) a thoirt a-mach a ’cleachdadh toradh anailis RNA Easy Fast Plant Tissue Kit.Agilent Bioanalyzer 2100 de RNA iomlan bho bhileagan Latha-lili. | |
Toradh anailis Agilent Bioanalyzer 2100 de RNA iomlan bho bhileagan Day-lly. | |
RNA air a thoirt a-mach à diofar shamhlaichean a tha air an liostadh sa chlàr a ’cleachdadh RNA Easy Fast Plant Tissue Kit. Meud elution: 50 μl; Meud luchdaidh: 2 μl. Chaidh an electrophoresis a dhèanamh aig 6 V / cm airson 15 min air agarose 1%. |
A-1 lysis cealla no homogenization gu leòr
---- Lùghdaich cleachdadh sampall, àrdaich an ìre de bufair lysis, àrdaich homogenization agus ùine lysis.
Tha suim sampall A-2 ro mhòr
---- Lùghdaich an ìre de shampall a chaidh a chleachdadh no àrdaich am bufair lysis.
A-1 lysis cealla no homogenization gu leòr
---- Lùghdaich cleachdadh sampall, àrdaich an ìre de bufair lysis, àrdaich homogenization agus ùine lysis.
Tha suim sampall A-2 ro mhòr
---- Feuch an toir thu sùil air a ’chomas giullachd as àirde.
Chan eil RNA A-3 air a lughdachadh gu tur bhon cholbh
---- An dèidh uisge gun RNase a chuir ris, fàg e airson beagan mhionaidean mus tèid a tharraing sa mheadhan.
A-4 Ethanol anns an eluent
---- An dèidh rinsing, centrifuge a-rithist agus thoir air falbh am bufair nighe cho mòr 'sa ghabhas.
Chan eil meadhan cultar cealla A-5 air a thoirt air falbh gu tur
---- Nuair a bhios tu a ’cruinneachadh cheallan, feuch an cuir thu às don mheadhan cultair cho mòr‘ s as urrainn dhut.
A-6 Chan eil na ceallan a tha air an stòradh ann an RNAstore air an centrifug gu h-èifeachdach
---- Tha dùmhlachd RNAstore nas motha na meadhan cultar cealla cuibheasach; mar sin bu chòir an fheachd ceud-ghluasadach a mheudachadh. Thathas a ’moladh centrifuge aig 3000x g.
A-7 susbaint RNA ìosal agus pailteas anns an sampall
---- Cleachd sampall adhartach gus faighinn a-mach a bheil an toradh ìosal air adhbhrachadh leis an sampall.
A-1 Chan eil an stuth ùr
---- Bu chòir nèapraigean ùra a stòradh ann an leaghan nitrogen sa bhad no sa bhad a chur ann an ath-ghiùlan RNAstore gus dèanamh cinnteach à buaidh às-tharraing.
Tha suim sampall A-2 ro mhòr
---- Lùghdaich sùim sampall.
A-3 RNase contamination
---- Ged nach eil RNase anns a ’bhufair a chaidh a thoirt seachad anns a’ phiseag, tha e furasta RNase a thruailleadh rè pròiseas às-tharraing agus bu chòir a làimhseachadh gu faiceallach.
Truailleadh electroforesis A-4
---- Cuir an àite am bufair electrophoresis agus dèan cinnteach gu bheil na stuthan consum agus an luchdachadh bufair saor bho thruailleadh RNase.
A-5 Cus luchdachadh airson electrophoresis
---- Lùghdaich an uiread de luchdachadh sampall, cha bu chòir luchdachadh gach tobar a bhith nas àirde na 2 μg.
Tha suim sampall A-1 ro mhòr
---- Lùghdaich sùim sampall.
A-2 Tha tòrr DNA ann an cuid de shamhlaichean agus faodar an làimhseachadh le DNase.
---- Dèan làimhseachadh DNase gun RNase chun fhuasgladh RNA a chaidh fhaighinn, agus faodar an RNA a chleachdadh gu dìreach airson deuchainnean às deidh làimhseachadh, no faodar a ghlanadh tuilleadh le innealan glanaidh RNA.
Airson glainneachan, bèicearachd aig 150 ° C airson 4 h. Airson soithichean plastaig, air am bogadh ann an NaOH 0.5 M airson 10 min, an uairsin air a roladh gu math le uisge gun RNase agus an uairsin sterilize gus RNase a thoirt air falbh gu tur. Feumaidh na h-ath-bheachdan no na fuasglaidhean a chaidh a chleachdadh san deuchainn, gu sònraichte uisge, a bhith saor bho RNase. Cleachd uisge gun RNase airson a h-uile ullachadh reagent (cuir uisge ri botal glainne glan, cuir DEPC gu dùmhlachd deireannach de 0.1% (V / V), crathadh tron oidhche agus autoclave).
Bho chaidh a stèidheachadh, tha an fhactaraidh againn air a bhith a ’leasachadh toraidhean den chiad ìre le bhith a’ cumail ris a ’phrionnsapal
de chàileachd an toiseach. Tha na toraidhean againn air cliù air leth fhaighinn anns a ’ghnìomhachas agus luachmhor am measg luchd-ceannach ùr is sean.